PCR实验室设计原则.得创实验室工程专业从事PCR实验室工程规划，设计，施工一条路净化工程公司，欢迎来电咨询：027-82289886
我们之前碰到过一些客户，说做PCR实验总是出现假阳性，明明没有加模板最后却扩出了产物。如果这种现象频频出现，就要注意一下操作环境了。如果你去百度上搜索“PCR出现假阳性了怎么办”，下面给出的建议一定会有防止交叉污染这条建议。有人说模板DNA是大分子，溶于去离子水中，怎么会无缘无故跑出来污染环境呢？小编将会一一解释。

位置的选择应根据以下要求和技术经济方案的比较确定:
1、应在大气含尘浓度较低、自然环境较好的地区；
2、应远离铁路、码头、机场、交通动脉、工厂、仓库、堆场等严重空气污染、振动或噪声干扰区域，如不远离严重空气污染源，应位于最大风向风侧，或全年最小风向风侧；
3、应布置在厂区内环境清洁、人流不穿越或少穿越的地区。
对于具有微振动控制要求的洁净厂房的位置选择，应实际测量周围现有振源的振动影响，并分析比较精密设备和精密仪器的允许环境振动值。
实验室与烟囱之间的水平距离不应小于烟囱高度的12倍。
实验室与交通干道之间的距离不宜小于50米。
实验室周围应设置环形消防车道(可使用交通道路)。如有困难，可沿厂房两条长边设置消防车道。
实验室周围的路面，应选用整体性好、灰尘少的材料。
实验室周围应进行绿化。可以种植草坪，种植对大气中粉尘浓度没有有害影响的树木，形成绿化社区，但不能阻碍消防作业。

PCR实验室分区及区域功能
PCR实验室分为四个区域，进⼊各⼯作区域必须严格按照单⼀⽅向进⾏，不同的⼯作区域使⽤不同的⼯作服（例如不同的颜
⾊）。⼯作⼈员离开各⼯作区域时，不得将⼯作服带出，四区域分别为：1.试剂配制区2.样品处理区3.核酸扩增区4.产物分析区如使⽤全⾃动分析仪，区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。
各区的功能：完备的实验室配套设施是保证实验⼯作的必要条件，应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器，如超净⼯作台、离⼼机、加样器等。
PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采⽤全送全排的⽓流组织形式。同时，要严格控制送、排风的⽐例以保证各实验区的压⼒要求。
1、试剂贮存和准备区 该实验区主要进⾏的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和⽤于标本制作的材料应直接运送⾄该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。 对与⽓流压⼒的控制，本区并没有严格的要求。
2、标本制备区 该区域主要进⾏的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加⼊⾄扩增反应管和测定RNA时 DNA的合成。本区的压⼒梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进⼊本区的⽓溶胶污染。另外，由于在加样操作中可能会发⽣⽓溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的⾛动。
扩增反应混合物配制和扩增区 该区域主要进⾏的操作为DNA或DNA扩增。ft外，已制备的DNA模板和合成的DNA(来⾃样本制备区)的加⼊和主反应混合液(来⾃试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进⾏。在巢式PCR测定中，通 常在第⼀轮扩增后必须打开反应管，因ft巢式扩增有较⾼的污染危险性，第⼆次加样必须在本区内进⾏。 本区的压⼒梯度要 求为：相对于邻近区域为负压，以避免⽓溶胶从本区漏出。为避免⽓溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的不必要的⾛动。个别操作如加样等应在超净台内进⾏。
4、扩增产物分析区该区域主要进⾏的操作为扩增⽚段的测定。如使⽤全⾃动封闭分析仪器检测，ft区域可不设。本区是最主要的扩增产物污染来源，因ft对本区的压⼒梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散⾄其它区域。
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PCR实验室空调通风系统设计及压力控制
PCR实验室没有严格的净化要求，但为了避免各实验区之间交叉污染的可能性，应采用全送全排的气流组织形式。同时，应严格控制输送和排气的比例，以确保每个试验区的压力要求。
3.1.试剂储存和准备区域
实验区的主要操作是储存试剂的制备、试剂的包装和主要反应混合物的制备。用于标本生产的试剂和材料应直接运输到该区域，不得通过其他区域。试剂原料必须储存在该区域，并制备所需的储存试剂。
对个区域对气流压力的控制没有严格的要求。
3.2标本制备区
该地区的主要操作是保存临床标本和核酸(RNA、DNA)提取、存储和添加到扩增反应管和测定RNA时DNA的合成。
该区域的压力梯度要求为：相对于相邻区域的正压，以避免从相邻区域进入该区域的气溶胶污染。此外，由于在样品添加过程中可能会发生气溶胶污染，因此应避免在该区域不必要的行走。
3.3.扩增反应混合物的制备和扩增区域
该区域的主要操作是DNA或DNA扩大。此外，已制备的DNA合成模板DNA(来自样品制备区)添加和主反应混合物(来自试剂储存和制备区)制备反应混合物也可在本区进行。PCR在测量中，反应管通常必须在第一轮扩增后打开，因此巢式扩增具有较高的污染风险，第二次加样必须在该区域进行。
该区域的压力梯度要求为：相对于相邻区域的负压，以避免气溶胶从该区域泄漏。为了避免气溶胶造成的污染，应尽量减少在该地区不必要的行走。应在超平台上进行个别操作，如添加样品。
3.4扩大产品分析区域
该区域的主要操作是测量扩增片段。如果使用全自动封闭分析仪进行检测，则不能设置该区域。
该区域是扩增产物污染的主要来源，因此该区域的压力梯度要求为：相对于相邻区域的负压，以避免扩增产物从该区域扩散到其他区域。
4预防和控制污染
PCR实验室规划设计的核心问题是如何避免污染。在实践中，有几种常见的污染类型：扩大产物污染；自然基因组DNA污染；试剂和标本之间的污染。一旦发生污染，必须停止实验，直到找到污染源，实验结果必须无效，需要重新进行实验。因此，在污染发生后，在实验室周围寻找污染源不仅需要时间和繁琐，而且浪费人力和物力资源。因此，为了避免污染，首先应该是预防，而不是排除。

武汉得创净化技术有限公司，坐落于湖北省武汉市，公司下配有净化工程部、清洁产品部、净化设备部。经营范围包含半导体材料、微电子技术、太阳能、LED、电子器件、仪器仪表、新型材料、新能源技术、生物技术、药业、食品类、化工厂、汽车制造等领域。设计专业、施工、组装、调节、净化室耗品、过滤水系统软件等各种各样净化工程一站式服务。公司自创立至今，本着心怀感恩、开拓创新、忠诚初心、做高品质新项目的行业核心理念，一直坚持用心基本建设清理区域的重任，通过十几年的勤奋，累积了充足的工作经验。以强悍的工程设计能量和经济实力，建立了一批技术性强劲的设计方案和施工精英团队。现阶段，公司有着中国领先的彩钢夹芯板生产流水线，年生产能力80万平方；大规格型号粗、中、高效送风口等净化设备。凭着优良的产品品质和一流的售后维修服务，公司依次为全国各地300好几家生产厂家修建了净化车间。