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PCR实验室设计规范,安装方法

来源:http://www.dcsyss.com/ 作者:DEIIANG得创 发布时间:2022-12-14 13:30

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PCR实验室设计

PCR实验室主要实验项目:病毒检测,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的检测和诊断,DNA指纹,个体识别,亲子鉴定及法医物证等等。
PCR实验室建设原则上分为四个单独的工作区域:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。
1、试剂准备区:用于试验试剂的准备。
该区域为正压,目的是防止污染物质溢入。该区域内部又可分为3个区域:普通提取试剂的准备区、PCR试剂准备区和PCR主反应液准备区。在普通提取试剂的准备区内准备一些样品核酸提取时所需的裂解液、提取液等;PCR试剂准备区用于PCR试剂的制备和保存。例如准备引物、探针等PCR试剂。为了防止交叉污染,避免反复冷冻和解冻,试剂存贮溶液应该被平均为小的工作体积,储存在这个房间以备后用:PCR主反应液准备区将进行主反应混合液(除了样品。所有PCR所需试剂的混合)添加到PCR管的操作。重要提示:不能将其它房间的材料(包括扩增、模板和目标核酸或阳性对照、供应品、或设备)带进试剂准备区。
2、样品准备区:该区域无压力设置要求。
该区域是用于对样品进行分样,将样品进行研磨、粉碎、匀浆的区域。由于在这些粉碎、研磨和匀浆处理过程中会产生气溶胶,因此,存在阳性样品污染后续操作的可能性。该区域与后面的区域应严格隔离,应放在与后面的三个区域隔开的独立的房间中。在样品准备区内还可设立一个专用的封闭区或房间用于样品的接收和储存。这个房间可以放置冰箱用于样品储存,应该和样品准备区其它区域隔离开。样品准备区域的人员不得进入试剂准备区。
3、核酸提取区:核酸提取区是进行样品核酸提取的区域。
该区域为负压,目的是防止核酸溢出造成污染。样品准备区又包括从样品中进行核酸提取和纯化的区域以及将核酸加到包含PCR主反应混合液管中的操作区域。添加完样品后,PCR管的盖子要尽可能快地盖好。使用PCR板和胶盖时,阳性对照和含目标序列的样品要与待测样本分开操作,以避免模板添加时造成交叉污染
重要提示:这个房间里的一切物品不得带人试剂准备区。
4、扩增和产品检测区:该区域是用来进行PCR扩增和PCR分析。
PER仪放置在这个区域。房间保持负压,目的是防止核酸溢出。在该区域人员一定要一直穿戴工作服和手套,在离开房间前脱去,防止扩增子污染其它地点。所有用于扩增和产品检测的设备要指定用于这个房间。PCR分析]二作也设置在该区域,例如:酶切、测序、克隆等,但实验室应尽可能把这些活动分隔在不同区域或不同房间。以降低扩增产物的污染风险。如果没有条件在该区域设立负压,此区域必须建立排风装置。

PCR实验室设计效果图 PCR实验室设计效果图
   

PCR实验室设计必须设计走廊吗?

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PCR实验室又称为基因扩增实验室,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精确度高达纳米级别,精确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据。
PCR实验室设计
一、PCR实验室基本结构
PCR实验室基本由四大结构组成,常见为:试剂准备区、制备区、扩增区和扩增分析区。
二、基本功能介绍:
1、准备区:主要进行实验所需试剂的准备工作,分装等,由传递窗运送至制备区,严禁走人员通道。
2、制备区:主要进行样品等保存,DNA/RNA的提取、贮存和其加入至扩增反应管和测定DNA/RNA的合成。
3、扩增区:主要进行DNA的扩增,已制备的DNA模版和合成的cDNA的加入和主板反应混合液制备成反应混合液等也可在扩增区内进行,在巢式PCR测定中,通常在首次扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高等污染危害性,二次加样必须在本区完成。
4、扩增分析:主要用来做扩增产物的测定,本区是主要的扩增产物污染来源,因此必须主意避免通过本区的物品或者工作服将扩增产物带出。
三、PCR实验室的走廊、传递窗设计常识
1. PCR走廊:并不是标配,进深不够时不要做PCR走廊,且PCR走廊会增加交叉污染。
这4个分区(试剂储存和准备区、标本制备区、核算扩增区、产物分析区)原本就不需连接在一起。且在物理空间上必须是完全相互独立的,各区域无论在空间上还是在使用中,应当始终处于完全的分隔状态,不能有空气的直接相通。
2. 传递窗:并非必须设置(只要不涉及洁/污分流就不需要设置传递窗),但一般实验机构/实验人员喜欢设置。
传递窗的本质同缓冲间,是物流的缓冲间。在PCRclass="wpcom_keyword_link"实验室设计中,试剂准备和标本制备间是重点保护的区域,此处最好不要加传递窗,防止交叉污染。实验中的污染风险主要来自于核酸扩增时的加样行为,但由于操作在生物安全柜内进行,且确保空气不外溢,因此不存在污染。
中国生物建设的新冠疫苗P3实验室和P3生产车间进展顺利

PCR实验室设计效果图 PCR实验室设计效果图
   

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