微生物实验室设计方案!
无菌技术可以有效地避免操作者自身感染微生物。
1.请判断以下材料或工具是否需要消毒或灭菌。如有必要,请选择合适的方法。
(1)用于培养细菌的培养基础和培养盘
(2)倒平板操作讨论.培养基础灭菌后,需要冷却到50℃左右时,可以用于倒平板。用什么方法来估算培育基的温度?
提示:用手触摸有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度刚下降到不烫手的时候,可以打倒平板。
2.为什么要让锥瓶瓶口通过火焰?
a:燃烧灭菌,防止瓶口微生物污染培养基。
3.平板冷凝后为什么要倒置平板?
a:平板凝结后,盘盖凝结水珠,凝结的培养基表面湿度也高,倒置平板,可以更好地挥发培养基表面的水分,防止盘盖的水珠落入培养基,造成污染。
4.在倒平板的过程中,如果不小心培养基溅到盘盖和盘底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
a:空气中的微生物可能在盘盖和盘底之间的培育基础上繁殖,所以最好不要用这个平板培育微生物。
(3)平板刻划操作的讨论
1.为什么在操作的第一步和每次刻划之前都会燃烧接种环?划线操作结束时,还需要烧烤接种环吗?为什么?
a:操作的第一步烧焦接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物,每次在划线前烧焦接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,下次划线时,接种环上的菌种直接来自上次划线的末端划线结束后,灼热接种环,能够立即杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。
2.灼热接种环后,为什么要等冷却后再进行划线?
a:接种环温度过高,不要杀菌。
3.做第二次和后续的划线操作时,为什么总是从上次划线的末端开始划线?
a:划线后,线末端细菌的数量比线的开始少,每次从上次划线的末端开始,细菌的数量随着划线次数的增加而逐渐减少,最终可以得到单个细菌繁殖的菌落。
(4)涂布平板操作的讨论
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板线和系列稀释的无菌操作要求,想想第二步该怎么做无菌操作
提示:从操作的细节保证无菌。例如,酒精灯与培养盘的距离适当,吸管头不接触其他物体,吸管在酒精灯火焰周围等。
(5)练习
1.提示:从微生物成长所需条件的角度来考虑。例如,微生物的生长需要水、空气、适当的温度,食品的保存可以通过保持干燥、真空的条件和冷藏等方法阻止微生物的生长。
2.提示:从这三种培养技术的原理、操作步骤等方面可以分别总结。例如,这三种培养技术都需要为培养物提供足够的营养,但是无土培养技术的操作不需要保证无菌的条件,其他两种技术都需要严格的无菌条件。
3.提示:这是一个开放的问题,答案不是唯一的,重点是鼓励学生积极参与,从不同的角度思考问题。例如,由于证明微生物不是自发的,微生物学可能发展成为独立的学科,巴斯德实验中使用的加热灭菌方法出现了有效的灭菌方法,该灭菌原理也适用于食品的保存等。